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晶抗生物羊小反芻獸疫病毒抗體檢測試劑盒檢測原理

羊小反芻獸疫病毒抗體檢測試劑盒由晶抗生物提供，包括羊小反芻獸疫病毒抗體說明書，羊小反芻獸疫病毒抗體試劑盒國產(chǎn)/進口產(chǎn)品等詳

細介紹。

詳情介紹

羊小反芻獸疫病毒抗體檢測試劑盒說明書

【產(chǎn)品名稱】

通用名:

羊小反芻獸疫病毒抗體檢測試劑盒

英文名:Test Kit for Antibodies to Goat Peste des Petits Ruminants Virus (ELISA)

【包裝規(guī)格】 96Tx1/盒、96Tx2/盒

【預(yù)期用途】小反芻獸疫是由小反芻獸疫病毒(Peste des Petits Ruminants Virus，PPRV)引起的一種急性接觸性傳染病，其特征為口

腔、舌粘膜糜爛、流淚、流鼻液。本病的易感動物為山羊，也可感染綿羊、白尾鹿等，但對牛無感染性。

本試劑用于檢測山羊血清中小反芻獸疫病毒抗體，可用于小反芻獸疫疫苗免疫效果評價。

【原 理】

本試劑盒系由預(yù)包被小反芻獸疫病毒重組抗原的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測羊血清、血漿

樣本中小反芻獸疫病毒抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本，經(jīng)溫育后若樣品中含有小反芻獸疫病毒抗體，則將與酶標板上抗

原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標記物，與酶標板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標記

物，在孔中加TMB底物液，與酶反應(yīng)形成藍色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)?

用酶標儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有小反芻獸疫病毒抗體。

【儲存及有效期】 儲存于陰涼干燥處(2-8°℃)

有效期期12個月。

包被板開封后請于2~8℃℃避光保存，避免受潮。使用期限為2個月。

【適用儀器】 含450nm、630nm波長的酶標儀，37℃C恒溫設(shè)備，可調(diào)微量移液器。

【樣品準備】

1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2~8℃保存，長期需置-20℃保存

2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋(如5ul血清加入195μ樣品稀釋液中，混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。

3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。

【檢驗方法】

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至幸溫。

2.取所需用量酶標板條，設(shè)空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2~8℃保存。

3.空白對照孔加樣品稀釋液100u;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100u;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100ul。

4.混勻，置37°C(推薦水浴)反應(yīng)30分鐘。

5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干

6.每孔加酶標記物100u(空白孔除外)。置37°C反應(yīng)30分鐘。

7.洗滌，同步驟5.

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50m，混勻，37℃C避光反應(yīng)10分鐘。

9.每孔加終止液50ul，混勻，用空白孔調(diào)零，于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)

【參考值】 實驗正常的情況下，陰性對照≤0.10，陽性對照≥0.6.

檢驗結(jié)果的解釋】

1.樣品A值≥0.38為陽性;樣品A值在0.2到0.38之間為可疑;樣品A值<0.2為陰性。

2.本實驗結(jié)果為陰性或可疑時表明羊只抗體水平不足，建議補打相應(yīng)疫苗。

試驗方法的局限性】

該試驗僅作為定性檢測山羊血清、血漿中小反芻獸疫病毒抗體，根據(jù)A值高低可作抗體水平強、中、弱的粗略評估。

【注意事項】

.實驗操作時需戴手套、穿工作衣，嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度，各種實驗廢棄物都應(yīng)按傳染物處理

2.終止液具有腐蝕性，應(yīng)避免接觸皮膚和衣物，如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。

3.酶標板從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋，未用完的酶標板需放入有干燥劑的密封袋中保存

4.濃縮洗滌液在低溫時容易結(jié)晶，使用時需恢復(fù)至室溫以*溶解。

5.洗滌時各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗>爭。

6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。

7.試驗結(jié)果的判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,

8.不同批號試劑組分不得混用。
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