其實(shí)歸納總結(jié)下來(lái)，ELISA的操作步驟也不過(guò)就那么幾個(gè)，每個(gè)步驟及關(guān)鍵注意點(diǎn)都熟練掌握之后，實(shí)驗(yàn)就會(huì)顯得容易簡(jiǎn)單多了。今天的實(shí)驗(yàn)技術(shù)內(nèi)容中，上海晶抗公司對(duì)ELISA檢測(cè)步驟加樣的要求進(jìn)行著重介紹：
在ELISA檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。
有此測(cè)定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器，在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間，這一保溫過(guò)程稱(chēng)為溫育，有人稱(chēng)之為孵育，在ELISA中似不恰當(dāng)。
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