ELISA試劑盒的洗滌在ELISA進(jìn)程中雖不是一個(gè)反應(yīng)進(jìn)程，但卻也決議著實(shí)驗(yàn)的勝敗。ELSIA?是靠洗刷來(lái)到達(dá)別離游離的和聯(lián)絡(luò)的酶符號(hào)物的目的。通過(guò)洗刷以*殘留在板孔中沒(méi)能與固相抗原或抗體聯(lián)絡(luò)的物質(zhì)，以及在反應(yīng)進(jìn)程中非特異性地吸附于固相載體的煩擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，而在洗刷時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的煩擾物質(zhì)洗刷下來(lái)。可以說(shuō)在ELISA操作中，洗刷是zui主要的關(guān)鍵技術(shù)，應(yīng)導(dǎo)致操作者的高度重視，操作者應(yīng)嚴(yán)厲按懇求洗刷，不得大意。
洗刷的方法除某些ELISA儀器配有格外的主動(dòng)洗刷儀外，手工操作有浸泡式和流水沖刷式兩種，進(jìn)程如下：
浸泡式
a.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液；
b.用洗刷液過(guò)洗一遍（將洗刷液注滿板孔后，即甩去）；
c.浸泡，即將洗刷液注滿板孔，放置1-2分鐘，間歇搖晃，浸泡時(shí)間不可隨意縮短；
d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清洗毛巾或吸水紙上拍干；
e.重復(fù)操作c和d，洗刷3-4次（或按說(shuō)明規(guī)矩）。
ELISA試劑盒在間接法中如本底較高，可增加洗刷次數(shù)或延伸浸泡時(shí)間。
微量滴定板多選用浸泡式洗刷法。
洗刷液多為含非離子型洗刷劑的中性緩沖液。
聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的聯(lián)絡(luò)是疏水性的，非離子型洗刷劑既含疏水基團(tuán)，也含親水基團(tuán)，其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵聯(lián)絡(luò)，然后削弱蛋白質(zhì)與固相載體的聯(lián)絡(luò)，并借助于親水基團(tuán)和水分子的聯(lián)絡(luò)效果，使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液情況，然后脫離固相載體。洗刷液中的非離子型洗刷劑通常是吐溫20，其濃度可在0.05%-0.2%之間，高于0.2%時(shí)，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低實(shí)驗(yàn)的靈敏度。
流水沖刷式 流水沖刷法開(kāi)端用于小珠載體的洗刷，洗刷液僅為蒸餾水乃至可用自來(lái)水。
洗刷時(shí)附接一格外設(shè)備，使小珠在流水沖擊下不斷地翻滾淋洗，持續(xù)沖刷2分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2分鐘，吸干即可。
浸泡式猶如盆浴，流水沖刷式則比方淋浴，其洗刷效果更為*，且也簡(jiǎn)潔、敏捷。已有實(shí)驗(yàn)標(biāo)明，流水沖刷式一樣也適用于微量滴定板的洗刷。
ELISA試劑盒洗刷時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面，洗刷效果更佳。
上海晶抗生物工程有限公司
地址：上海市金山工業(yè)區(qū)亭衛(wèi)公路6558號(hào)9幢2441室
版權(quán)所有：上海晶抗生物工程有限公司 備案號(hào)：滬ICP備16026504號(hào)-5 總訪問(wèn)量：688419 站點(diǎn)地圖 技術(shù)支持：智慧城市網(wǎng) 管理登陸
